手术过程中，无菌观念的强弱，可能直接影响到手术的成败甚至病人的生命。因此，所有参加手术的人员必须严格执行无菌操作原则。
（1）手术人员一经“洗手”，手臂即不准再接触未消毒物品，穿无菌手术衣后，背部、腰部以下和肩部以上都应认为是有菌区，不能接触；同样，手术台边缘以下的布单，也不要接触。
（2）不可在手术人员的背后传递器械物品，坠落到无菌布单或手术台边缘外的器械物品不得拾回再用。
（3）手术中如手套破损或接触到有菌的地方，应另换无菌手套；前臂或肘部碰触有菌地方．应更换手术衣或加套无菌袖套；无菌巾、布单等物，如已潮湿，其无菌隔离作用不再完整，应立即更换，如条件不允许，应加盖干的无菌单。
（4）在手术过程中，同侧手术人员如需调换位置时，应背对背移动位置。
（5）暂时不用的器械、用物摆放在器械桌上，并用无菌巾覆盖；尖锐器械、缝针应尖朝上．以防穿透无菌敷料被污染；需植入体腔内的物品，使用时应用专用器械或无菌敷料夹持，不能直接用手接触。
（6）污染手术行隔离技术：在切开空腔脏器之前，应用盐水垫保护周围组织，并及时吸除外流的内容物，被污染的器械敷料应放在污染盘内，不再使用。手术人员更换手套。
（7）尽可能限制参观人数，减少污染机会。参观手术时，参观者不能站得太高或离术者太近，也不可经常在室内走动。
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